新型DNA分子克隆系统──Nimble Cloning

日期：2020-04-20 13:10:17　　浏览次数：1560

      DNA分子克隆技术广泛用于生物学各领域，其创新和发展直接推动着分子生物学的进步。目前使用的分子克隆方法存在受酶切位点受限、试剂盒价格昂贵等问题。本研究开发了一种新的克隆技术，命名为Nimble Cloning，其核心是在目标载体的克隆位点处设计SfiI-ccdB-SfiI结构，与此结构侧翼具有20bp左右重叠序列的目标DNA在Nimble Mix反应液作用下直接与环状质粒完成克隆。Nimble Cloning的优点包括：1. 直接将DNA克隆到环状载体，使用环状载体不仅简化了实验操作，还提高了克隆效率；2. 试剂成本低，无需购买昂贵试剂盒；3. 线性PCR产物和环状质粒上的DNA（单个，或多个，或混合）均可直接克隆到目标载体；4. DNA片段与目标载体SfiI-ccdB-SfiI结构侧翼的重叠序列可设计在接头序列的外围，不重叠的接头序列可在反应中去除，使得该方法既可用于通用重叠序列（接头）的标准化克隆，也可用于特需要求的去除接头序列的无缝克隆。鉴于这些特点，Nimble Cloning可灵活用于单片段、多片段、多克隆位点等多种形式的克隆，有望在分子生物学研究中得到广泛应用。

       适用范围及市场前景：使用范围为生物学实验室

       成果所处阶段及融资需求：目前处于技术和产品的推广阶段，有融资需求。