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新型DNA分子克隆系统──Nimble Cloning

日期:2020-04-20 13:10:17  浏览次数:1366

      DNA分子克隆技术广泛用于生物学各领域,其创新和发展直接推动着分子生物学的进步。目前使用的分子克隆方法存在受酶切位点受限、试剂盒价格昂贵等问题。本研究开发了一种新的克隆技术,命名为Nimble Cloning,其核心是在目标载体的克隆位点处设计SfiI-ccdB-SfiI结构,与此结构侧翼具有20bp左右重叠序列的目标DNA在Nimble Mix反应液作用下直接与环状质粒完成克隆。Nimble Cloning的优点包括:1. 直接将DNA克隆到环状载体,使用环状载体不仅简化了实验操作,还提高了克隆效率;2. 试剂成本低,无需购买昂贵试剂盒;3. 线性PCR产物和环状质粒上的DNA(单个,或多个,或混合)均可直接克隆到目标载体;4. DNA片段与目标载体SfiI-ccdB-SfiI结构侧翼的重叠序列可设计在接头序列的外围,不重叠的接头序列可在反应中去除,使得该方法既可用于通用重叠序列(接头)的标准化克隆,也可用于特需要求的去除接头序列的无缝克隆。鉴于这些特点,Nimble Cloning可灵活用于单片段、多片段、多克隆位点等多种形式的克隆,有望在分子生物学研究中得到广泛应用。

       适用范围及市场前景:使用范围为生物学实验室

       成果所处阶段及融资需求:目前处于技术和产品的推广阶段,有融资需求。

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